产品简介:
嘌呤霉素(Puromycin)是白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)产生的一种氨基糖苷类抗生素,可快速、高效地终止真核与原核生物的蛋白质合成。其结构与氨酰-tRNA3′末端相似,能进入核糖体A位并掺入延伸中的肽链,造成链的提前释放与永久终止,从而杀死细胞:对革兰氏阳性菌作用最强,对酸杆菌次之,对革兰氏阴性菌及真核微生物(藻类、原生生物)亦有抑制;哺乳动物和昆虫细胞在2μg/mL以上浓度、48h内即可被清除99%以上。此外,嘌呤霉素还表现出一定抗肿瘤活性,常被用作研究转录调控、细胞分化及基因表达顺序的蛋白合成抑制剂。
抗性由pac基因编码的嘌呤霉素N-乙酰转移酶(PAC)赋予,该酶通过乙酰化使药物失活。由于pac基因已广泛克隆至慢病毒、逆转录病毒及多种真核/原核表达载体,嘌呤霉素成为筛选和维持稳定转染/感染细胞株(尤其是慢病毒系统)以及CRISPR/Cas9编辑后阳性克隆的首选药物。个别情况下亦可用于携带pac的大肠杆菌筛选。
本品为10mg/mL、经0.22μm过滤除菌的嘌呤霉素盐酸盐水溶液,可直接用培养基稀释。真核细胞常规筛选浓度1–10μg/mL,具体用量请依据细胞类型预实验确定。